Réponse dépendante du sous-type du virus de l’hépatite B durant la phase initiale du traitement par la lamivudine

Nous avons mené une enquête longitudinale de mois sur la réponse sous-type du virus de l’hépatite B HBV au traitement par lamivudine chez des patients consécutifs atteints d’hépatite B chronique. Le sous-type HBV semble mieux répondre à la lamivudine en monothérapie que le sous-type HBV. pour la plus faible incidence de souches résistantes à la lamivudine observées chez les personnes infectées par le sous-type HBV ayw pendant le suivi

Les ains du VHB ont un grand impact clinique Le VHB peut être divisé en sous-types principaux adw, ayw, adr et ayr; Les sous-types prédominants aux États-Unis et en Europe Seules des données limitées sont actuellement disponibles sur la question de savoir si le sous-type VHB affecte l’efficacité du traitement par lamivudine Dans une étude pilote, nous avons récemment montré que le sous-type HBV Ici, nous rapportons la première étude de l’influence du sous-type VHB sur la réponse virale au cours de la phase précoce du traitement par lamivudine dans une cohorte plus grande de patients par des mesures longitudinales de l’ADN du VHB et du VHB. Patients et méthodes Quarante-trois patients consécutifs, hommes et femmes, atteints d’une infection chronique par le VHB ont été inclus dans l’étude. La décision de traiter ces patients avec la lamivudine a été prise indépendamment du protocole d’étude approuvé par le comité d’éthique local. Association Le consentement éclairé a été obtenu de tous les participants Tous les patients ont reçu lamivudine par jour pendant des mois Les données de suivi étaient disponibles pour les patients ayant reçu un traitement par lamivudine pendant un mois supplémentaire. L’adhésion au traitement par lamivudine était élevée chez tous les patients, estimée par le nombre de comprimés déduits des intervalles de prescription. niveau d’ALT ≤ U / L atteint au moins une fois pendant la période d’observation, atteinte de taux indétectables d’HBeAg et émergence de HBVF résistant à la lamivudine ou de chaque échantillon de sérum obtenu, taux d’antigène de surface du HBV AgHBs, HBeAg, anti-HBs, anti-HBe, et anti-HBc ont été déterminées au moyen de EIA Axsym; Les nombres de copies de HBV d’Abbott Laboratories ont été quantifiés à des intervalles de -mois par PCR en temps réel LightCycler-DNA Master SYBR GreenI; Roche Diagnostics qui ciblait une région conservée du génome HBV qui chevauche les gènes codant pour la protéine X et l’ADN polymérase Les paires d’amorces HBVF ‘-CCGTCTGTGCCTTCTCATCTG-‘ et HBVR ‘-AGTCCAAGAGTYCTCTTATGYAAGACCTT-‘ ont été utilisées, et les amplicons ont été quantifiés par fluorescence LightCycler DNA Master comparé aux dilutions en série d’une préparation standard externe clonée HBV, plasmide pHBV, qui a été étalonnée avec des échantillons de référence Eurohep La limite de détection de la PCR a été montrée être des copies HBV par ml de sérum EuroHepU par ml de sérum avec Pour les résultats de PCR positifs, les amplicons ont été séquencés pour les mutations associées à la résistance à la lamivudine. La région de la polymérase a été amplifiée par une PCR nichée avec les amorces ‘-AGACTCGTGGTGGACTTCTCT -‘ / ‘-AGAATGTTTGCTCCAGACC-‘ comme amorces externes et ‘ -GGATGTGTCTGCGGCGTTT – ‘/’ -ACCCCATCTTTTTGTTTTGTTAGG- ‘comme amorces internes, couvrant la région polymérase de c odon to codon Les deux brins des produits d’amplification ont été séquencés pour les mutations LM, MI et MV associées à la résistance à la lamivudine en utilisant le kit de séquençage à terminaison BigDye Applied Biosystems et un séquenceur automatisé. des sous-types HBV Pour l’analyse statistique des charges virales quantitatives et des valeurs ALT, les données pour les patients infectés par le sous-type VHB ont été comparées aux données pour les patients infectés par le sous-type VHB par le test U Mann-Whitney. Une analyse univariée pour déterminer l’influence du sexe et de l’état initial de l’HBeAg sur la réponse à la lamivudine Les variations dans le temps du nombre médian de copies du VHB dans chaque groupe ont été analysées en utilisant le test de Wilcoxon. ALT ont été comparés par l’utilisation d’un test de comparaison multiple avec une analyse de la variance -way le modèle de mesures répétées de split-plot Le test exact de Fisher a été utilisé pour cal Les estimations de Kaplan-Meier ont été réalisées à l’aide du progiciel WinStat, et la valeur de P a été calculée en fonction de la valeur de l’ADN du VHB, des infections à VHB résistantes à la lamivudine et de la normalisation du taux d’ALT. utilisation du test de log-rank de Cox-Mantel Cependant, en raison de la petite taille de l’échantillon, la puissance statistique était de μ% pour un résultat non significatif. La valeur AP de μ était statistiquement significative. Résultats Vingt-deux patients portaient le sous-type HBV; les patients portaient le sous-type adw et le patient portait le sous-type adw et portaient le sous-type HBV ayw le groupe ayw; Les groupes adw et ayw ne différaient pas en ce qui concerne l’âge moyen, le sexe, le titre médian d’ADN du VHB, les taux de positivité de l’AgHBe et les taux médians d’ALT au tableau de référence. qui ont participé au suivi, les caractéristiques de base des patients du groupe adw étaient similaires à celles des patients du groupe ayw, ainsi que du tableau de la cohorte totale. Par conséquent, les résultats du suivi n’ont pas été biaisés par la sélection.

Tableau View largeTélécharger les caractéristiques des patients enrôlés dans une étude de la réponse sous-type du virus de l’hépatite B au traitement par lamivudineTable View largeTélécharger les caractéristiques des patients enrôlés dans une étude de la réponse du virus de l’hépatite B dépendante du sous-type à la lamivudine la diminution du taux d’ADN du VHB par rapport à la valeur initiale était significative dans les deux groupes de sous-types au groupe adw du mois: diminution moyenne, copies de journaux / mL [IC%, – copies de journal / mL]; P μ; groupe ayw: diminution moyenne, copies de journal / mL [IC%, – copies de journal / mL]; P μ Dans le groupe ayw, les taux d’ADN du VHB ont continué à diminuer significativement entre les mois et la diminution moyenne du traitement par la lamivudine, les copies log / mL [% CI, – log copies / mL]; P =, qui n’a pas été observée dans le groupe adw Les patients du groupe ayw présentaient des taux moyens d’ADN du VHB significativement plus faibles que ceux du groupe adw au mois vs les copies log / mL, respectivement; P =, mois vs copies de journal / mL, respectivement; P =, et mois vs log copies / mL, respectivement; P =; Une analyse de sous-groupe a montré que ces différences significatives étaient indépendantes du sexe et de l’état initial de l’AgHBe. En utilisant un test de comparaison multiple, la différence entre les niveaux d’ADN du VHB entre le groupe adw et le groupe ayw était également significative. dans les groupes adw et ayw avec des taux d’ADN du VHB inférieurs à la limite inférieure de détection du test de PCR étaient% de patients versus% de patients au mois P =,% de% du mois P =,% de% du mois P =, et% de% du mois P = non significatif [NS]

Figure View largeTélécharger les niveaux sériques du virus de l’hépatite B VHB ADN chez les patients pendant le traitement par lamivudine contre l’hépatite B chronique. Les barres indiquent les écarts-types des valeurs significatives entre les porteurs du sous-type HBV et les porteurs du sous-type HBV. Les barres indiquent SD de la valeur moyenne Les valeurs P sont fournies pour les différences significatives entre les porteurs du sous-type HBV et les porteurs du sous-type HBV ayw NS, non En dépit du fait qu’ils recevaient un traitement par la lamivudine, les patients du groupe ayw présentaient des taux moyens d’ALT significativement plus faibles que les patients du groupe adw au mois vs U / L; P =, mois vs U / L; P =, mois vs U / L; P =, et mois vs U / L; P = Ces résultats étaient également significatifs dans le test de comparaison multiple P = Il n’y avait pas de corrélation entre les nombres de copies du VHB et les taux d’ALT pendant le traitement à la lamivudine Les taux normaux d’ALAT étaient atteints en% des patients du groupe adw et en% des patients le groupe ayw P = NSA total des patients% ont été infectés avec des isolats qui présentaient des mutations associées à la résistance à la lamivudine au mois Les mutants détectés étaient MI n =; dans le groupe adw et dans le groupe ayw, LM / MI n =; dans le groupe adw et dans le groupe ayw, et LM / MV n =; dans le groupe adw et dans le groupe ayw Les proportions de patients infectés par le VHB infectés par des isolats qui présentaient une résistance à la lamivudine dans le groupe adw et dans le groupe ayw étaient les suivantes: des patients par rapport aux patients au mois P = NS; Les temps moyens pour la résistance à la lamivudine étaient de mois dans le groupe adw et de mois dans le groupe ayw. Une estimation de Kaplan-Meier a révélé une probabilité significativement plus élevée pour les souches du VHB de rester sensibles à la lamivudine. dans le groupe ayw pendant la période de traitement à la lamivudine P =; figure

l’incidence de l’infection par les souches résistantes à la lamivudine chez les patients nord-américains / européens des patients était significativement plus élevée que chez les patients asiatiques des patients; P μ, déterminé par le test χ; données non montrées Bien que cela n’ait pas été déterminé dans ces études, la prévalence des sous-types de VHB varie considérablement en Asie et en Amérique du Nord / Europe Par conséquent, le sous-type VHB peut être une raison importante des différentes incidences. de la résistance à la lamivudine rapportée dans ces études Une corrélation de certains sous-types avec une réponse prolongée au traitement antiviral a déjà été démontrée pour le traitement de l’hépatite C Dans l’infection par le VHB, le sous-type semble être associé à un risque accru de et le développement du carcinome hépatocellulaire Dans une étude pilote antérieure , nous avons observé un risque significativement plus élevé de développer des souches résistantes à la lamivudine chez les patients porteurs du sous-type HBV que chez les patients porteurs du sous-type HBV. possible parce que les sous-types de VHB adw et ayw sont également répartis dans notre cohorte, en raison d’une forte proportion de patients turcs, tous Pour étudier plus avant les mécanismes de sélection des sous-types de VHB résistant à la lamivudine, nous avons étudié la réponse précoce au traitement par la lamivudine et constaté que, entre les mois et le traitement, la charge moyenne du VHB dans le groupe Cela a été suivi par une forte incidence d’infection par des souches résistantes à la lamivudine dans le groupe adw du mois à la fin du suivi. Cette constatation est en ligne avec celle d’une étude récente dans laquelle nous avons montré que l’incidence de la résistance à la lamivudine était significativement plus élevée chez les patients dont les taux d’ADN du VHB étaient constamment détectables au cours des premiers mois de traitement, comparativement aux patients ayant des taux d’ADN du VHB indétectables après des mois de traitement. la sélection des variants du VHB résistant à la lamivudine est survenue principalement entre les mois et la monothérapie à la lamivudine et était fortement dépendante de la capacité réplicative de fond Étant donné que la réponse de l’ADN du VHB au cours des premiers mois de traitement par la lamivudine semble prédire la probabilité de sélectionner des variants du VHB résistants à la lamivudine, l’efficacité du traitement antiviral initial contre le VHB semble essentielle. une combinaison de lamivudine avec de nouveaux médicaments antiviraux, tels que l’adéfovir ou l’entecavir, actuellement en phase III, peut être supérieure à la lamivudine en monothérapie, en particulier chez les patients infectés par le sous-type HBV. Une autre alternative est l’association lamivudine-IFN-α. , qui a déjà été montré pour réduire significativement l’incidence des variants du VHB résistants à la lamivudine après des mois de traitement Le mécanisme sous-jacent de la réponse différente à la lamivudine chez les patients infectés par les sous-types HBV adw et ayw n’est pas clair. Les polymérases HBV de certains sous-types peuvent être inhibées à différents degrés par la lamivudine. En raison des chevauchements des cadres de lecture de la polymérase et de l’HBsAg du VHB, le système immunitaire peut jouer un rôle important dans la suppression et la sélection du VHB de type sauvage et mutant. Il a été démontré récemment que le traitement à la lamivudine Les faibles titres d’ADN du VHB chez les patients infectés par le sous-type HBV ayw pendant le traitement par la lamivudine peuvent entraîner des processus de sélection des variants du VHB qui sont présents chez les patients infectés par le VHB. Nous avons classé les génotypes adw et adw en tant que « sous-type adw » et les génotypes ayw, ayw /, et ayw en tant que « sous-type ayw ». Par conséquent, on pourrait spéculer que le génotype adw et adw sont des sous-types. régions immunodominantes responsables de la sélection des variants du VHB peuvent être situés dans les domaines d ou y de HBsAg Cependant, d’autres études in vitro sont nécessaires pour enquêter sur la sélection me En conclusion, selon nos données, le sous-type HBV ayw semble réagir significativement mieux au traitement par la lamivudine que le sous-type HBV. Une suppression insuffisante du sous-type ADH au début de la phase de traitement peut conduire à forte incidence de résistance à la lamivudine dans le sous-type VHB analogue au traitement de l’infection par le VIH , la résistance à la lamivudine peut nuire aux combinaisons suivantes de traitements antiviraux contre l’hépatite B chronique et peut jouer un rôle important, notamment dans le sous-type HBV. patients infectés Parce que cela aurait un grand impact thérapeutique, d’autres études impliquant de plus grandes cohortes sont nécessaires de toute urgence pour étudier le rôle des sous-types du VHB dans le traitement antiviral